Scála UF/DF-Samhaltú Síos le Caiséid Malartach Cainéal Scáileáin
Cad ba cheart a dhéanamh má tá an spás dearaidh a bunaíodh le linn tréithriú próisis níos leithne nó níos cúinge ná na raonta paraiméadar oibriúcháin a úsáidtear chun baisceanna trialacha cliniciúla Chéim III a mhonarú?
Ⅰ. Anailís Fadhb
Comaoin:Baineann an cheist le hionadaíochas múnla scála síos do phróiseas ultrascagtha/scagtha (UF/DF). Ós rud é nach bhfuil caiséad ultrascagacháin cainéal scáileáin C leis an méid pore/MWCO riachtanach ar fáil, tá caiséad ultrascagacháin chainéil scáileáin A- beartaithe a úsáid mar ionadach. Is í an phríomhcheist ná an bhféadfaidh an caiséad scáileáin A bheith ina mhúnla ionadaíoch síos scála.
Chun an cheist seo a fhreagairt, ní mór dúinn a thuiscint ar dtús an bhfuil difríochtaí idir caiséid ultrascagacháin le dearaí éagsúla cainéal scáileáin agus cén tionchar a d’fhéadfadh a bheith ag na difríochtaí seo ar an bpróiseas UF/DF.
1. Roghnú Cineálacha Éagsúla Cainéal Scáileáin i gCaiséid Ultrascagtha
Maidir leis an eolas ar chineálacha éagsúla cainéal scáileáin i gcaiséid ultrascagacháin, soláthraítear cur síos mionsonraithe i (Doiciméad 1: Próiseas Ultrascagacháin/Driffiltithe a Fhorbairt Feidhmchláir Ard-Tiúchan/Slaodachta):
Cuirimid ceithre scáileán éagsúla ar fáil faoi láthair: (A, C, D agus V) i raon formáid caiséad Pellicon®.
Scáileán: Scáileán daingean a úsáidtear le haghaidh tuaslagán próitéin caol nó réitigh slaodacht íseal. Níl an fhí daingean oiriúnach do thuaslagáin próitéin ard-tiubhaithe mar go bhfuil an titim brú ard do-ghlactha ag níos mó slaodachta. Mar sin féin, soláthraíonn an scáileán seo feidhmíocht flux níos fearr de ghnáth.
Scáileán C:Scáileán garbh a úsáidtear le haghaidh sruthanna táirge le slaodacht suas le 15 cP. Soláthraíonn an scáileán C feidhmíocht flosc maith ach tá an titim brú os cionn na teorann úsáide nuair a mhéadaíonn an slaodacht.
V scáileán: Scáileán C ar fionraí. Tugann an scáileán V titeann brú níos ísle ná an scáileán C, ach tá an fheidhmíocht flux i bhfad níos ísle i gcomparáid le scáileán C.
D scáileán: Tá mogalra garbh agus inneach athraithe ag an scáileán nua seo i gcomparáid leis an scáileán caighdeánach C. Dearadh é chun titim brú níos ísle a thairiscint gan an pionós feidhmíochta flux mór a fuarthas nuair a bhí teicneolaíocht scáileáin ar fionraí á úsáid.
Bunaithe ar an tuairisc thuas ar chineálacha éagsúla scáileáin agus faisnéis atá ar fáil go poiblí, is féidir achoimre a dhéanamh ar shaintréithe bealaí scáileáin éagsúla mar seo a leanas:
2. Tionchar Cineálacha Éagsúla Cainéal Scáileáin ar Phróisis UF/DF
Bunaithe ar na tuairiscí thuas, is féidir a thuiscint le réasún go mbíonn tionchar díreach ag cineálacha éagsúla cainéal scáileáin ar fheidhmíocht próisis UF/DF:
Dinimic sreabhach agus fórsa lomadh:
Toisc go gcinnfidh struchtúr an scáileáin (mogalra) patrún sreafa an tsreabháin trasna an dromchla membrane, chomh maith leis an méid suaiteachta agus na fórsaí lomadh a ghintear mar thoradh air.
Éifeachtúlacht aistrithe mais:
Bíonn tionchar ag an gcineál scáileáin ar pholarú tiúchana agus ar rialú bréanaithe membrane.
Feidhmíocht próisis:
Ar nós flosc deiridh, ráta coinneála, agus cáilíocht an táirge (m.sh., lomadh-comhiomlánú spreagtha).
(Tagairt 2: "Éifeacht lomadh cainéil-spreagtha ar an mbitheolaíocht le linn scagdhealaithe ultrascagtha (UF/DF), 2016")léiríonn sé an tionchar atá ag fórsaí lomadh de bharr dearaí éagsúla cainéal scáileáin ar cháilíocht táirgí bithchógaisíochta amhail antasubstaintí monachlónacha agus próitéiní comhleá.
Sa staidéar seo, faoi choinníollacha táirgthe caighdeánaithe de shreabhadh beathaithe seasta (300 LMH) agus brú trasmembrane (1.4 barra), rinneadh measúnú ar mhodúil scannáin ó thrí mhonaróir-MilliporeSigma, Pall, agus NovaSep-, lena n-áirítear meánscáileán, solas{4}}scáileán fionraí, agus cumraíochtaí cainéil oscailte. Baineadh úsáid as ceithre bhitheolaíocht ionadaíocha, lena n-áirítear lomadh-IgG4 íogair, lomadh-IgG1 fulangach, agus próitéiní comhleá, mar shamplaí tástála. Cuireadh modhanna anailíse ar nós tástálacha filterability SEC, MFI, DLS, agus Vmax i bhfeidhm chun measúnú córasach a dhéanamh ar fheidhmíocht hiodrálach dearaí éagsúla cainéal agus ar a dtionchar ar cháilíocht an táirge.
Léiríonn na torthaí turgnamhacha go gcinnfidh an cainéal (scáileán) struchtúr go díreach déine lomadh agus éifeachtúlacht aistrithe mais.The cainéal scáileán mheán taispeáint an chomhéifeacht aistrithe mais is airde; Mar sin féin, bhí an strus lomadh balla agus an strus lomadh iomlán ardaithe go suntasach. I gcodarsnacht leis sin, chruthaigh cumraíocht an chainéil oscailte (gan scáileán) an strus lomadh ab ísle, ach d'fhulaing sé ó fheidhmíocht aistrithe mais thar a bheith bocht, rud a d'éiligh timthriallta athchúrsála iomarcacha agus mar thoradh ar éifeachtacht phróisis íseal. Léirigh an cainéal scáileáin fionraí solais (Pellicon D) an fheidhmíocht iomlán is fearr. Ní raibh a chomhéifeacht aistrithe mais ach 22% níos ísle ná comhéifeacht an scáileáin mheánach, ach 260% níos airde ná sin dearadh an chainéil oscailte. Idir an dá linn, bhí a strus lomadh iomlán ar an gceann ab ísle i measc na bhfoirmíochtaí ar fad, ag 1120 Pa amháin. I dtéarmaí cáilíochta an táirge, léirigh próitéiní íogaire lomadh a próiseáladh ag baint úsáide as an meánscáileán méadú 78%–186% ar chomhiomláin intuaslagtha, chomh maith le méadú suntasach ar fho-cháithníní infheicthe. Bhí luach Vmax le haghaidh scagachán steiriliú 0.2 μm an-íseal, rud a léiríonn sileadh membrane dian agus droch-scagachán. I gcodarsnacht leis sin, níor léirigh samplaí a próiseáladh leis an gcainéal scáileáin fionraí solais ach méadú 0%–25% ar chomhiomlánú, laghdú suntasach ar leibhéil na gcáithníní, agus feabhas 3–18 × ar fheidhmíocht scagacháin. Dhearbhaigh staidéir ard-tiúchana comhchruinnithe freisin gur choinnigh cainéal an scáileáin ar fionraí solais brú trasmembrane cobhsaí agus go bhféadfadh sé tiúchain os cionn 200 g/L a bhaint amach go héasca. I gcomparáid leis sin, léirigh an cainéal meánscáileáin méadú géar ar bhrú ag comhchruinnithe arda, rud a fhágann go raibh sé deacair comhchruinnithe sprice a bhaint amach agus mar thoradh ar chaighdeán an táirge díghrádaithe.
(Tagairt 3: "Iompar ultra-scagacháin na n-adeno athchuingreach-veicteora víreasacha gaolmhara a úsáidtear i géinteiripe", 2021)i gcomparáid leis an tionchar atá ag dearaí cainéal scáileáin C agus D ar phróiseas veicteoirí AAV UF/DF.
Thaispeáin na torthaí nuair a úsáideadh an scáileán D, go raibh an brú trasmembrane criticiúil (TMP) níos ísle, agus laghdaíodh an meánfhlosc 14%.
Léiríonn Fíor{0}}C sonraí flosc i gcoinne TMP ag baint úsáide as an scannán 30 kDa leis an scáileán "D". Ní bheadh an scáileán D nó an scáileán V oiriúnach le haghaidh ultra-scagadh ar shruthanna beatha ar shlaodacht íseal san obair seo. Bhain obair ár ngrúpa roimhe seo úsáid as na bealaí scagtha seo le haghaidh antasubstaintí monaclónacha ard-tiúchana agus comhleá próitéiní [13,33]. I gcás AAV2 leis an ngléas scáileáin "D", baineadh amach an TMP criticiúil ag TMP níos ísle ná é sin leis an ngléas scáileáin "C" a thaispeántar i bhFíor. 2A. Ag teacht le hionchais theoiriciúil, bhí an flosc leis an ngléas scáileáin "D" 14% ar an meán níos ísle ag rátaí sreafa beatha Q=350 L/h/m2 agus Q=500 L/h/m2 (p < 0.05) i gcomparáid leis an ngléas scáileáin "C", ach ní raibh difríocht ar bith idir an scáileán "C" (RC2A) agus an ráta sreafa beathaithe de ghléasanna QDB (RC2A) agus an ráta sreafa QDB.=120 L/h/m2 (p> 0.05) (Fíor. 2C).
Ⅱ Moltaí cur chun feidhme:
Is féidir a bhaint de thátal mar sin gur fachtóir ríthábhachtach é cineál scáileáin a théann i bhfeidhm ar fheidhmíocht próisis agus ar cháilíocht an táirge araon, agus nach mór é a chur san áireamh i gceart i múnlaí scála síos. Dá réir sin, mar fhreagra ar an bhfiosrúchán, mura bhfuil caiséad membrane scáileáin C comhionann ar fáil, níl sé oiriúnach ach ionadú díreach a dhéanamh bunaithe ar "an méid céanna pore ach cineál scáileáin difriúil," mar shampla caiséad scannáin A-scáileáin a chur ina áit.
De ghnáth ní ionadaíonn ionadú díreach (ie, ag baint úsáide as na paraiméadair oibriúcháin chéanna), go háirithe sna cásanna seo a leanas:
· Nuair atá an táirge íogair ó thaobh lomadh (eg, antasubstaintí monaclónacha, próitéiní comhleá, veicteoirí víreasacha).
· Nuair is gá feidhmíocht próisis ar mhórscála a thuar go beacht, lena n-áirítear flosc, am scagacháin, agus iompar salach.
· Nuair a dhéantar staidéir ar thréithriú próisis chun spás dearaidh na bparaiméadar próisis ríthábhachtach (CPPanna) a shainiú, amhail brú trasmembrane (TMP) agus treoluas tras-sreafa.
An bhfuil aon roghanna eile oiriúnacha nó bearta cur chun feidhme eile ann? Tar éis plé a dhéanamh, molann foireann Xingchen an cur chuige seo a leanas:
1.Caiséid membrane malartacha atá comhionann ó thaobh feidhme a shainaithint
Is éard atá i gceist leis seo ná caiséid scannáin ar scála beag a aithint ó sholáthraithe eile a léiríonn tréithe hidridinimiciúla cosúla, go háirithe iompar lomadh.
Moltar dul i gcomhairle le soláthraithe caiséad scannáin ultra-scagacháin agus táirgí ar scála saotharlainne a iarraidh atá deartha bunaithe ar phrionsabail chomhchosúla agus a thaispeánann dinimic sreafa atá inchomparáide leis an gcaiséad cainéal scáileáin C a úsáidtear i dtáirgeadh.
Ba cheart príomhpharaiméadair caiséid iarrthóra a chur i gcomparáid leis an sprioc-chaiséad scáileáin C, lena n-áirítear airde an chainéil (nó trastomhas hiodrálach), struchtúr an scáileáin (m.sh. cineál scáileáin), ábhar scannáin, agus méid pore, toisc go gcinneann na fachtóirí seo na fórsaí lomadh a ghintear i gcaiséid ultrascagacháin.
2.Úsáid caiséad A-scáileáin agus déan cúiteamh as difríochtaí hidridinimiciúil trí pharaiméadair oibriúcháin a choigeartú
Go teoiriciúil, is gnách go mbíonn cainéal sreafa níos déine ag cumraíocht an scáileáin A ná an scáileán C, rud a d’fhéadfadh strus lomadh níos airde a bheith mar thoradh air. Dá bhrí sin, ba cheart an difríocht lomadh idir an dá chóras faoin ráta sreafa beatha céanna a mheas trí ríomh nó trí insamhalta dinimic sreabhach ríomhaireachtúil (CFD).
Ba cheart ráta sreafa beatha (Q) an chórais scáileáin A{-scála beag A{-a choigeartú ansin ionas go mbeidh an strus lomadh a ghintear ar dhromchla an scannáin ag teacht leis an strus lomadh arna tháirgeadh ag an gcóras scáileáin C mórscála faoi na spriocchoinníollacha sreafa oibriúcháin.
Faoi na coinníollacha lomadh coigeartaithe, déan turgnaimh ar scála beag chun príomhtháscairí feidhmíochta a thomhas amhail flosc agus ráta coinneála. Ba cheart na torthaí seo a chur i gcomparáid ansin le sonraí stairiúla nó le sonraí turgnamhacha comhthreomhara ón gcóras scáileáin C mórscála chun a chumas réamhaisnéise a bhailíochtú.
3.Fócas ar ghnéithe ar leith agus bunaigh samhail laghdaithe ar scála ionadaíochta
Mura bhfuil fócas tréithrithe an phróisis ar tháirgí atá íogair ó thaobh lomadh de, nó más é an príomhchuspóir ná tréithe coinneála membrane seachas hidridinimic a mheas, d’fhéadfadh tionchar na ndifríochtaí scáileáin a bheith measartha beag.
Mar sin, is gá a léiriú, laistigh de raon feidhme do staidéir, nach foinse ríthábhachtach inathraitheachta é cineál scáileáin. Mar shampla, más é an príomhchuspóir imscrúdú a dhéanamh ar an éifeacht a bhaineann le laghdú meáchain mhóilíneach membrane (MWCO) ar spriocphróitéin a choinneáil, agus go n-oibríonn an próiseas faoi choinníollacha íseal lomadh, d'fhéadfadh sé go mbeadh sé inghlactha scáileán A a úsáid le haghaidh réamhscagtha.
Mar sin féin, ba cheart a aithint go bhféadfadh aon staidéir ina dhiaidh sin a bhaineann le sreabhán, salú, am tiúchana, nó comhiomlánú táirgí a bheith claonta mar gheall ar dhifríochtaí sa chineál scáileáin.
